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    大鼠C肽(C-P)ELISA說明書

    大鼠C肽(C-P)ELISA說明書

    產(chǎn)品型號(hào): 96T/48T

    所屬分類:大鼠ELISA

    產(chǎn)品時(shí)間:2024-08-16

    簡(jiǎn)要描述:大鼠C肽(C-P)ELISA價(jià)格公道、*,售后服務(wù)完整,并提供免費(fèi)代檢測(cè)服務(wù)!本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中C肽(C-P)含量。

    詳細(xì)說明:

    大鼠C肽(C-P)ELISA說明書

     

    本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中C肽(C-P)含量。

    標(biāo)本處理及要求

     1.血清、血漿標(biāo)本可直接測(cè)定;

    2.尿液、腦脊液、腹腔液:2000-3000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘后,取上清液待測(cè)。

    3.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

    4.采集后盡早進(jìn)行實(shí)驗(yàn),若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

    試劑盒組成

    1

    20倍濃縮洗滌液

    30ml×1

    7

    終止液

    6ml×1

    2

    酶標(biāo)試劑

    6ml×1

    8

    標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L

    0.5ml×1

    3

    酶標(biāo)包被板

    12孔×8

    9

    標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

    1.5ml×1

    4

    樣品稀釋液

    6ml×1

    10

    說明書

    1

    5

    顯色劑A

    6ml×1

    11

    封板膜

    2 

    6

    顯色劑B

    6ml×1/

    12

    密封袋

    1個(gè)

    自備物品

    1 、 37 ℃ 恒溫箱

    2 、 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

    3 、 精密移液器及一次性吸頭

    4 、 蒸餾水

    5 、 一次性試管

    6 、 吸水紙

    操作步驟

    1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔 10 孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)

    準(zhǔn)品 100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二

    孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl

    混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔

    中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各

    50μl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μl,混

    勻后從第七、第八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)

    品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,

    濃度分別為180ng/L120ng/L ,60ng/L,30ng/L, 15ng/L)。

    2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣

    品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣

    品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混

    勻。

    3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。    

    4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

    5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此

    重復(fù) 5次,拍干。

    6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

    7. 溫育:操作同 3

    8. 洗滌:操作同 5。

    9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

    15 分鐘.

    10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

    11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止

    液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

    計(jì)算

        以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的

    OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)

    準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),

    即為樣品的實(shí)際濃度。

    注意事項(xiàng)

    1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

    2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

    3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

    4.  請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔OD值的),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

    5.  嚴(yán)格按說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

    6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

    7.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

    9.底物請(qǐng)避光保存。

    保存條件及有效期

    1.試劑盒保存:;2-8℃。

    2.有效期:6個(gè)月

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