本試劑盒采用雙抗原夾心酶聯免疫法（ELISA）測定標本中豬弓形蟲抗體（Tox-Ab）。用純化的弓形蟲抗體（Tox-Ab）抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中弓形蟲抗體（Tox-Ab）相結合，經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后再與HRP標記的弓形蟲抗體（Tox-Ab）抗原結合，形成抗原-抗體-酶標抗原復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標本中弓形蟲抗體（Tox-Ab）的存在與否。

　　二、豬弓形蟲抗體檢測的試驗操作步驟：

　　1.編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）

　　2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，

　　3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

　　4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用

　　5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

　　6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

　　7.溫育：操作同3。

　　8.洗滌：操作同5。

　　9.顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘

　　10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

　　11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。