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    SuperQuickRT cDNA*鏈合成試劑盒說明書
    更新時(shí)間:2015-05-18 點(diǎn)擊量:1412

     

    SuperQuickRT cDNA*鏈合成試劑盒說明書

     

     

    SuperQuickRT cDNA Kit

    (For Real-time PCR)

    SuperQuickRT cDNA*鏈合成試劑盒

    (For Real-time PCR)

    目錄號(hào):YJ2381

    保存條件:-20℃。

    規(guī)格說明

     

         Cat. No.                            YJ2381B      YJ2381

         Kit Size                                25         100

         SuperQuickRT Mix                      12.5 μl      50 μl

         5×RT Buffer(For Real-time PCR)        55 μl       220 μl

         Primer Mix                            27.5 μl     110 μl

         dNTP Mix (2.5 mM Each)                55 μl       220 μl

         RNase-Free Water                       1 ml        1 ml

     

     

            本產(chǎn)品僅供科研使用,請(qǐng)勿用于臨床診斷及其他用途  

     

     

    產(chǎn)品簡介

     

      本產(chǎn)品是為Real-time  RT-PCR研發(fā)的快速逆轉(zhuǎn)錄試劑,其包含從RNA模板逆轉(zhuǎn)錄

    成cDNA*鏈所需的全部試劑,優(yōu)化的反應(yīng)體系為快速逆轉(zhuǎn)錄酶提供更可靠的反應(yīng)條

    件。SuperQuickRT逆轉(zhuǎn)酶逆轉(zhuǎn)錄效率高,可對(duì)少量RNA模板進(jìn)行良好的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),

    15分鐘即可完成熒光定量 PCR模板cDNA*鏈合成。另外,逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)溫度可以提

    高到50 oC,可通讀GC含量高和二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的RNA模板。

     

    產(chǎn)品特點(diǎn)

    1.快速:42 oC,15min可完成cDNA*鏈合成。

    2.反轉(zhuǎn)錄效率高:反轉(zhuǎn)錄效率高于90%。

    3.靈敏度高:pg級(jí)模板也可以得到高質(zhì)量的cDNA。

    4.通讀復(fù)雜模板:GC含量高和二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜模板。

     

     

    注意事項(xiàng)

     

    1.在操作過程中應(yīng)避免RNase污染,防止RNA降解或?qū)嶒?yàn)中的交叉污染,建議操作人

       員帶口罩和一次性手套并經(jīng)常更換手套,使用專門的儀器和耗材。

    2.逆轉(zhuǎn)錄體系配制在冰上進(jìn)行操作,防止RNA發(fā)生降解。試劑盒的酶使用后盡快置于

       -20 oC保存,并盡量避免反復(fù)凍融。

    3.Primer Mix是由Oligo(dT)和random primer配制而成,也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選用Oligo-dT

       Primer或Gene Specific Primer。

    4.反應(yīng)體系可倍比放大,10 μl反應(yīng)體系可zui大使用1μg總RNA。

    5.對(duì)于二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的RNA模板,建議在操作步驟之前,將模板RNA在65℃孵育5min立刻置于冰上,短暫離心后進(jìn)行下一步操作。

    操作步驟

     

    1.將模板RNA在冰上解凍;將試劑盒組分在室溫解凍后立刻置于冰上,使用前將每種

       溶液渦旋振蕩混勻,并經(jīng)短暫離心后使用。

    2.根據(jù)以下表格配制反應(yīng)體系,渦旋震蕩混勻,短暫離心,使管壁上的溶液收集到管底。

     

    試劑                10 μl反應(yīng)體系           終濃度

     

    dNTP Mix (2.5 mM Each)               2 μl          500 μM Each

    Primer Mix                           1 μl

                             1)

    RNA Template                         X μl         10 pg~1 μg2)

    5×RT Buffer(for Real-time PCR)       2 μl              1×

    SuperQuickRT Mix                    0.5 μl

    RNase-Free Water                  up to 10 μl

     

       注意:1)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要可使用Oligo-dT Primer或Gene Specific Primer,建議10 μl 反應(yīng)體系加入Oligo-dT Primer 25 pmol,或Gene Specific Primer 2.5 pmol 。

     

       2)如果總RNA量大于1 μg,請(qǐng)按比例擴(kuò)大反應(yīng)體系。

    3.42℃孵育15分鐘。

       注意:對(duì)于二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜或GC含量高的模板,可以提高逆轉(zhuǎn)錄溫度至50℃,增強(qiáng)逆轉(zhuǎn)錄效率。

    4.85℃孵育5分鐘,使逆轉(zhuǎn)錄酶失活。

    5.短暫離心后置于冰上,再進(jìn)行后續(xù)Real-time PCR檢測,如果需要長時(shí)間保存,請(qǐng)

       置于-20℃。

     

       注意:進(jìn)行Real-time PCR反應(yīng)時(shí),逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加量應(yīng)不超過PCR反應(yīng)總體積的1/10。

     

     

                                               2  

     

     

     相關(guān)產(chǎn)品信息

     

     

    目錄號(hào)           產(chǎn)品名稱                      產(chǎn)品特點(diǎn)

     

    YJ0580        TRIzon總RNA提取試劑            適用范圍廣的RNA提取試劑

     

    YJ0581        超純RNA提取試劑盒   兼具有適用范圍廣和純度高特點(diǎn)的RNA提取試劑

    YJ0597        超純RNA提取試劑盒(含DNaseI)   靈敏度高,可識(shí)別pg級(jí)別的模板。

    YJ0741        SuperRT cDNA*鏈合成試劑盒  與RNA親和力強(qiáng),能夠通讀GC含

    量高,二級(jí)結(jié)構(gòu)復(fù)雜的RNA模板。

     

    YJ2569        HiFiScript cDNA*鏈合成試劑盒    獲得cDNA產(chǎn)物逆轉(zhuǎn)錄(針對(duì)于熒光定量PCR)

     SuperQuickRT cDNA*鏈合成試劑盒(For Real-time PCR)

     

    YJ2381                        僅需15分鐘,即可完成熒光定量PCR所需的cDNA

     

                                                                         即用型逆轉(zhuǎn)錄mix,只需加入RNA和水

                                 SuperQuickRT MasterMix

    YJ2391                                                即可反應(yīng)。僅需15分鐘,即可完成熒光                     (for Real-Time PCR)

                                                           定量PCR所需的cDNA

     

                                                  熒光定量PCR—SYBR Green法

    YJ0957        UltraSYBR Mixture

                                                     特異性強(qiáng)、靈敏度低、擴(kuò)增效率高

     

                                            熒光定量PCR—Taqman法

    YJ0932        GoldStar Taqman Mixture 

                                                    特異性強(qiáng)、靈敏度低、擴(kuò)增效率高

     

     

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