Eagle’s MEM僅含有水溶性維生素（B組維生素,膽堿類,葉酸,股醇,煙堿,但不包括生物素,）包括無血清培養基M199 CMRL1066 （來源于M199）以及RPMI1640都含有p-氨苯甲酸（PABA）.雖然LHC-9含有維生素A,MCDB110含有維生素E ,但只有M199包含了所有的脂溶性維生素（A,D,E,K）,無血清培養基中某些維生素（例如膽堿和煙堿）的濃度有所增加.維生素的加入量是有限的,例如葉酸在濃縮的儲存液中會產生沉淀,通常認為這一極限值決定了細胞死亡與生長比率的降低程度,而不是zui大細胞密度.與某些氨基酸一樣,維生素的需求量是憑經驗的,通常與某個細胞系建系過程中zui初使用的培養基有關,例如,Fisher’s培養基含有高濃度的葉酸,這是因為L5178Y對葉酸的依賴性,在這種培養基的發展過程中,葉酸就被沿用下來.